今天给大家分享一个关于蛋白质(鉴定蛋白质的试剂)鉴定的问题。以下是边肖对这个问题的总结。让我们来看看。
一、如何鉴别蛋白质
1.燃烧物体,看它是否能闻到烧焦的羽毛。如果它能闻到烧焦的羽毛,就证明蛋白质的存在。
2.蛋白质与浓硝酸反应。如果能变性产生黄色不溶物,那么这个物体就是蛋白质。
3.将含有蛋白质的豆类研磨成浆,然后过滤,取滤液进行检测。可以先在滤液中加入氢氧化钠(NaOH),再加入缩二脲试剂。如果有紫色反应,那就是蛋白质。
4.通过质谱仪,其原理主要是将肽质量指纹与蛋白质数据库中蛋白质的理论PMF进行比较。
二、蛋白质的鉴定方法?
1.最简单的方法,也是人们最耳熟能详的方法,就是对物体进行灼烧,看是否能问到烧焦的羽毛味,如果可以问到烧焦的羽毛味,那么证明有蛋白质的存在。2.中学的化学课上也教过我们不少的方法,比如说吧蛋白质和浓HNO3进行反应,如果能够变性产生黄色不溶性物质,那么该物体是蛋白质。
3.还有一种方法就是把含有蛋白质的屋子磨成浆然后过滤,取滤液进行测试,可以先在滤液中加氢氧化钠(NaOH),然后再加入双缩脲试剂,如果出现紫色反应,就为蛋白质。
三、鉴别蛋白质的方法有哪些
常见的蛋白质鉴定方法有:一、最简单的方法就是对所要鉴定的物体进行灼烧
二、使用化学药剂进行化学反应来鉴定蛋白质
三、较为精准的方法是使用仪器进行蛋白质鉴定,如质谱仪等
在生物学研究中经常会遇到一些关于蛋白质鉴定的问题,如单一蛋白质或者简单混合物的鉴定;对单一蛋白质的序列分析等。这一类蛋白质鉴定,在精密度上要求较高,所以几乎都是采用质谱仪器,来对蛋白质进行精密鉴定。
质谱技术是鉴定蛋白质的其中一种平台技术。可用到的质谱仪有Thermo Fisher的Q Exactive质谱仪,LTQ Orbitrap Velos质谱仪,以及AB SCIEX的6500 Q TRAP质谱仪。所在鉴定机构的不同,在硬件品牌的使用上也会有不同。
蛋白质鉴定的流程一般分三大步:蛋白质提取、纯化、鉴定。这个流程是一个将蛋白质层层“解剖”的过程,从中我们可以对蛋白分子量进行测定,蛋白胶点、胶条、IP样品蛋白质进行鉴定,非变性质谱分析以及Pull-down靶蛋白质谱鉴定等,较为细致的去分析蛋白质中的各种物质、性质等。
四、如何鉴别蛋白质
双缩脲试剂可用于鉴定蛋白质。
缩二脲(NH _ 2 ConHCONH _ 2)是两分子尿素在180℃左右加热,释放出一分子氨的产物。在强碱性溶液中,缩二脲与硫酸铜生成紫色络合物。缩二脲试验产生的紫色络合物的颜色与蛋白质浓度成正比,而与蛋白质的分子量和氨基酸组成无关,因此可以用来测定蛋白质的含量。
优点:双缩脲法测定蛋白质的范围为1~10mg蛋白质,操作简单快速。它既适合手工操作,也适合自动分析,具有良好的重复性和线性关系。缩二脲试剂可以长期保存(如果保存瓶中出现黑色沉淀,则需要重新配制)。
缺点:灵敏度差,测量范围窄,样品要求大,不同蛋白质产生的颜色深浅相似,所以常用于快速但不是很准确的蛋白质测定。干扰测定的物质包括:性质为氨基酸或肽类的缓冲液,如TrIs缓冲液,因为它们产生阳性显色反应,铜离子也容易被还原,有时会出现红色沉淀。
蛋白质的作用:
人体内的一些生理活性物质,如胺类、神经递质、多肽激素、抗体、酶、核蛋白以及细胞膜上和血液中的蛋白质等,都离不开蛋白质,蛋白质在调节生理功能和维持新陈代谢中起着极其重要的作用。人体运动系统中肌肉的构成以及肌肉在收缩、做功、完成动作过程中的代谢都与蛋白质有关。没有蛋白质,体育锻炼是不可能的。
在生物学上,蛋白质被解释为氨基酸通过肽键连接形成的多肽,再由多肽连接形成的物质。一般来说,它是构成人体组织器官的支架和主要物质。蛋白质缺乏:成年人:肌肉消瘦,免疫力下降,贫血,严重者水肿。
未成年人:生长发育停滞,贫血,智力发育差,视力差。蛋白质过量:蛋白质无法储存在体内,也无法被身体吸收。蛋白质摄入过多会导致蛋白质中毒,甚至因代谢紊乱而死亡。
以上内容参考百度百科-缩二脲试剂。
以上内容参考百度百科-蛋白质。
以上是边肖对鉴定蛋白质(鉴定蛋白质的试剂)及相关问题的回答。希望鉴定蛋白质(鉴定蛋白质的试剂)的问题对你有用!