今天跟大家分享一个关于毛细管电泳(高效毛细管电泳)的问题。以下是这个问题的总结。让我们来看看。
毛细管电泳的分离模式
毛细管区带电泳
地区
电泳,
CZE)是分析带电溶质最常用的模式。由于迁移率不同,样品中的每种组分被分成不同的区域。为了减少电渗流和吸附,可以对毛细管内壁进行化学修饰。毛细管凝胶电泳(毛细管
凝胶
电泳(CGE)毛细管凝胶电泳是在毛细管中填充单体引发聚合形成凝胶,主要用于蛋白质、DNA等大分子化合物的测定。另外,将聚合物溶液和其他具有筛分功能的物质如葡聚糖、聚氧化乙烯等装入毛细管进行分析,称为毛细管无凝胶筛分电泳,所以这种模式有时也称为毛细管无凝胶筛分电泳,可分为凝胶和无凝胶筛分。胶束电动毛细管色谱(胶束
动电的
毛细管
电泳(MECE)胶束电动毛细管色谱,在缓冲液中加入十二烷基硫酸钠等离子体表面活性剂形成胶束,被分离的物质分布在水相和胶束相(准固定相)之间,随电渗流在毛细管中迁移,实现分离。该模型可用于中性物质的分离。亲和毛细管电泳
(亲和力
毛细管
电泳,
ACE)亲和毛细管电泳是将毛细管内壁包被或在凝胶中加入亲和配体,通过不同的亲和力达到分离的目的。毛细管电色谱
(毛细管
电色谱,
CEC)毛细管电色谱(Capillary electrochromatography)是将高效液相色谱的固定相填充到毛细管中或涂在毛细管内壁上,以电渗流为流动相的驱动力的色谱过程。该模型具有电泳和液相色谱的分离机理。毛细管等电聚焦电泳
等位的
聚焦,CIEF)毛细管等电聚焦电泳,将通过内壁涂层的电渗流降至最低,然后将样品与两性电解质混合。两个电极槽分别为酸性和碱性。增加电压后,毛细管内建立了pH梯度,溶质向毛细管内的等电点迁移,形成明显的区域。聚焦后,溶质通过压力或改变检测器末端电极槽中液体的pH值通过检测器。毛细管电泳(毛细管电泳)
等速电泳,
CITP)毛细管等速电泳,根据溶质的电泳程度,使用铅电解质和后续电解质来分离溶质。
CZE、CGE和MECE是应用最广泛的模型。
毛细管电泳的特点;优势
1.电泳柱效率更高,可达105 m-1 ~ 106 m-1,分离速度更快。样品的分析可以在几十秒到几十分钟内完成。
2.溶剂和样品的消耗都很小,样品消耗也只是以纳米为单位升级。
3、没有高压泵输液,所以仪器成本更低。
4.通过改变操作方式和缓冲溶液的组成,毛细管电泳具有很大的选择性,可以有效地分离各种不同性质的分离对象。
毛细管电泳的注意事项
对于实验结果的可靠性和重现性来说,毛细冲洗起着至关重要的作用,每次冲洗都必须认真完成,不允许缩短冲洗时间或不冲洗。
实验结束后,必须用水冲洗毛细管,否则可能会堵塞毛细管,严重影响实验结果。希望能引起足够的重视。
冲洗毛细管时,不要对其施加电压。讲义上给的工作电压是不允许改变的,也不建议改变采样时间。
以上内容参考百度百科-毛细管电泳。
毛细管电泳的基本原理
毛细管电泳的基本原理
毛细管电泳(CE)又称高效毛细管电泳(HPCE),是近年来发展最快的分析方法之一。1981年,Jorgenson和Lukacs首先提出在内径为75μm的毛细管柱中利用高压进行分离,建立了现代毛细管电泳。
1984年,Terabe等人建立了胶束毛细管电动色谱。1987年,Hjerten建立了毛细管等电聚焦,Cohen和Karger提出了毛细管凝胶电泳。
从1988年到1989年,出现了第一批毛细管电泳的商用仪器。在短短的几年时间里,由于满足了以生物工程为代表的生命科学各个领域对多肽、蛋白质(包括酶和抗体)、核苷酸甚至脱氧核糖核酸(DNA)的分离分析要求,CE发展迅速。
毛细管电泳是经典电泳技术和现代微柱分离技术相结合的产物。与高效液相色谱相比,毛细管电泳的相似之处在于它是一种高效的分离技术,仪器操作可以自动化,并且两者有许多不同的分离模式。
两者的区别在于ce用迁移时间代替了HPLC中的保留时间,ce的分析时间通常小于30min,比HPLC更快。对于CE,从理论上推导出理论塔板高度与溶质的扩散系数成正比,对于扩散系数小的生物大分子,柱效远高于HPLC。
CE要求的样品是nl级,最低270fl,流动相的量只有几毫升,而HPLC要求的样品是μl级,流动相需要几百毫升甚至更多。但CE只能微量制备,HPLC可用于常量制备。
以上是毛细管电泳和高效毛细管电泳的介绍。不知道你有没有从中找到你需要的信息?如果你想了解更多这方面的内容,记得关注这个网站。